最常见的血液学指标异常是总蛋白浓度升高,主要是因为球蛋白浓度增高,特别是γ球蛋白。[21,22]在一份研究中表明,患有渗出性病变的猫中50%的案例有高蛋白血症,没有渗出性病变的案例中70%的猫患有高蛋白血症。[23]实验室诱发病例研究发现,在早期感染时,只有α2球蛋白出现升高,而γ球蛋白和抗体滴度升高只有在出现临床症状前才出现。[24,25] 从γ球蛋白典型的高水平和抗体滴度升高可以得出结论高γ球蛋白血症是特异性的抗猫冠状病毒免疫反应引起的。抗体滴度和高γ球蛋白血症显示了线性关系,但是在γ球蛋白数值一定条件下,抗猫冠状病毒滴度变化比较大,这些暗示了另外的自身免疫反应在fip致病机理中起了很大的作用。另外b细胞受刺激后同样可以产生部分γ球蛋白,这些结果都使得γ球蛋白增高。至此,患有fip的猫总蛋白浓度可以达到非常高,高达120g/l,甚至更高。白蛋白与球蛋白比值比血清总白蛋白浓度或是γ球蛋白浓度具有更高诊断价值,可以让我们把fip与其它类似疾病相鉴别诊断,因为血清白蛋白下降可能导致生成不足合并肝脏衰竭或蛋白流失。[27,28]患fip猫的蛋白丢失主要是由于免疫复合物沉积到肾脏引起;当肠道有肉芽肿性病变时,蛋白也可以从肠道丢失;当有血管炎时,蛋白也可以通过渗出□□流失。[28]白蛋白与球蛋白比值小于0.8。
血清蛋白电泳液常用来诊断怀疑fip的案例。主要用来分区是单□□或是多□□的γ高球蛋白血症是由fip还是由肿瘤引起的。但是猫患有fip时,这两种球蛋白都存在,在肿瘤案例中也是相同情况。因此电泳检测的价值就受到限制。
其它实验室指标包括肝脏酶、胆红素、bun、cre也常见到升高,这些数值的变化,主要取决于器官受损害的程度。高胆红素血症和黄疸比较常见,通常反应肝脏坏死。有时fip病例胆红素升高没有任何溶血、肝脏疾病或是胆管疾病的证据。这种异常的指标通常只有在被血症的动物可以见到;胆红素转移和分泌进入胆管系统受到限制,造成这种情况的可能原因是高水平的tnfα抑制穿膜作用。因此,如果出现高胆红素,同时没有溶血和肝脏指标变化,fip的嫌疑将增大。[28]
最近研究集中在急性期反应指标包括α1-acid-gly-prote(agp),当猫患有fip时,这种血清急性期蛋白会增高。agp升高(>3mg/ml)时可以为fip的诊断加分,但是这个蛋白在其它炎性疾病时同样会升高,因此其不具有特征性诊断意义。
眼科检查
影像学检查
影像学检查根据临床需求检查项目包括:胸腹部x线片,腹部b超检查、胸部b超检查机心脏超声检查。以便区分腹水、胸水、心包积液等等。并可在b引导下作穿刺,以便为进一步诊断提供依据。
四)、积液检查
所有患有积液的猫中,fip约占到一半。[34]积液的表现形式有:胸腔积液、腹腔积液、胸腹腔同时积液、心包积液等等。很多人将腹腔内抽出黄色、发粘的液体称为“典型传染性腹膜炎”,但是仅仅检查到这些液体,而没有其它检查或是症状来佐证,则不能够做出诊断。有时患有fip的猫其积液可能与常见的表现不同,如报道抽出纯乳糜胸液体,后经诊断确诊为fip。[35]
通常情况下,液体内的蛋白含量很高(>3.5mg/dl),一般都为渗出型,而细胞含量较低(<5000有核细胞/ml)。
要区分猫渗出性还是漏出性液体,可以使用李凡他试验。在一篇关于猫积液性疾病的研究报告中指出李凡他试验的阳性预测性为86%,阴性预测性为96% ,而这些积液性案例的fip患病率为51%。[28]在猫患有细菌性腹膜炎、淋巴肉瘤时李凡他试验结果会呈阳性,但是这些情况很容易通过其他检查项目以及细胞学检查或是细菌培养等方式进行鉴别诊断。
因fip导致的猫神经性损伤,分析脑脊液可以看到蛋白含量增高(50-350mg/dl,正常值不超过25mg/dl)脑脊液细胞增多(100-10000有核细胞/ml)主要包括中性粒细胞、淋巴细胞核和巨噬细胞。[36-38]但是这个指标并非是特异性的,很多猫患有fip并表现神经症状时,脑脊液检查结果正常。
五)、测量抗体
血清抗体滴度检测是用途比较广泛的方法。但是非常高比例猫冠状病毒(fv)阳性的猫,绝大部分是不会发展为传染性腹膜炎(fip)的。临床上没有针对fip抗体的检测,所有的抗体检测均是针对猫冠状病毒的。这项检测项目实际应用中看来是没有诊断价值的,根据这个结果来判断猫是否患有fip是明显错误的方案。有文章报道因为检测fv抗体,错误引导大家认为是患有fip而导致死亡的猫比猫本身患fip死亡的案例要高很多。[39]同时抗体滴度检测同样存在不稳定性,有文章报道,同一个猫的血清分成五份,分别送到美国的五个不同实验室,居然给出来5个不同的结果。[40]
需要值得注意的是冠状病毒抗体阳性并不能表示患有fip,同样未检测到冠状病毒抗体也不能排除fip。低或是中度的抗体滴度没有诊断价值。[28]
积液或是脑脊液的抗体滴度检测,对于fip诊断同样意义不大。[43-46]
(六)、rt-pcr检测
使用反转录pcr技术检测血液中的猫冠状病毒的频率呈上升趋势,但是还没有一种pcr技术可以准确诊断猫传染性腹膜炎(fip)。
(七)、免疫复合物检测
fip是免疫介导性疾病,抗原抗体复合物在病理过程中起到了重要的作用,有人建议在血清或是积液中检测这种复合物。抗原抗体复合物的检测可以使用酶联免疫检测试验(elisa),但是这种手段同样受到限制,一篇大量fip和对照组案例的研究报
报告显示器阳性预测值不高,只有67%左右。
八)开腹探查及尸体剖检
对于难诊断性的猫传染性腹膜炎案例,开腹探查是最有效的诊断途径。可以检查到腹腔内脏器的病变,如腹膜、肠系膜、肝脏、肾脏、脾脏、肠系膜淋巴结、肠道表面浆膜层等部位病变。另外可以切取部分病变组织送检,做组织荧光染色和免疫组化进一步诊断。
巨噬细胞内猫冠状病毒抗体免疫荧光检测
方法有两个:一个是使用免疫荧光染色法检测巨噬细胞内fv抗体(积液内巨噬细胞),另外一个是使用免疫组织化学(简称免疫组化)检测组织内的巨噬细胞内fv抗体。免疫染色并不能区分“无害”fv和引起fip的fv。但是只有引起fip的fv大量存在于巨噬细胞时检测时才会被染上色。最近有一份对171个案例的研究报告,其中检测组中的猫被分为两组,一组是确定为fip(占总数的64%),对照组为确定为其他病的非fip动物,结果显示免疫荧光染色阳性组的动物,100%为fip案例。[28] 但是这个检测中阴性预测值并不高,只有57%,有人解释主要原因是渗出液中的巨噬细胞数量较少才导致的阴性结果。[28]
免疫组化用来检测组织内fv抗体,已经被证明若是猫fip阳性,则其准确率达到100%。[52,53]然而这种方法的检测需要手术开腹探查才可取到需要的组织。对照研究显示,开腹探查切取组织样本与细针穿刺活检取得的样本在诊断敏感性方面相近。[54]
因此这里有两种检测方法,如果有积液,则做积液涂片,然后做抗体荧光染色法检测巨噬细胞内抗体;如果没有积液则需要做组织内的免疫组化试验来确定。
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